Question

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O método de Sanger baseia-se em uma reação de sequenciamento com utilização de terminadores de cadeia (didesoxinucleotídeos, ddNTPs) marcados com fluorescência, além de nucleotídeos naturais (dNTPs). Originalmente, o produto da reação era submetido a uma eletroforese em gel de poliacrilamida que permitia realizar a leitura da sequência inicial de DNA. Atualmente, a eletroforese é feita em capilar dentro dos sequenciadores automáticos. Sobre o método, assinale a opção correta.

Accepted Answer

B) A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com apenas um iniciador por reação e uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), onde os dNTPs encontram-se em maior quantidade do que os ddNTPs e a leitura da sequência é realizada de baixo para cima no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente), após a eletroforese.

Answer

A) A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com dois iniciadores por reação e uma mistura de nucleotídeos dNTPs e ddN- TPs, onde os ddNTPs encontram-se em maior quantidade do que os dNTPs, e a leitura da sequência é realizada de baixo para cima no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente), após a eletroforese.

Answer

C) A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com apenas um iniciador por reação e uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), onde os ddNTPs encontram-se em maior quantidade do que os dNTPs e a leitura da sequência é realizada de baixo para cima no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente) após a eletroforese.

Answer

D) A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com dois iniciadores por reação e uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), onde os ddNTPs encontram-se em maior quantidade do que os dNTPs e a leitura da sequência é realizada de cima para baixo no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente), após a eletroforese.

Answer

E) A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com apenas um iniciador por reação e uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), onde os ddNTPs encontram-se em maior quantidade do que os dNTPs e a leitura da sequência é realizada de cima para baixo no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente), após a eletroforese.

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