Question

Uma proteína produzida em G. diazothophicus apresenta massa molecular de 55kDa e ponto isoelétrico (pI) igual a 6,2. Após a lise celular, deseja-se purificar o extrato proteico produzido. Qual é a condição adequada para a purificação da proteína ao utilizar uma resina aniônica forte e eluente gradiente de NaCl?

Accepted Answer

B) Tampão acetato pH = 5,0. Em pH abaixo do pI, a proteína está carregada negativamente e interage com o trocador aniônico, sendo eluida com diminuição de NaCl.

Answer

A) Tampão acetato pH = 5,0. Em pH abaixo do pI, a proteína está carregada positivamente e interage com o trocador aniônico, sendo eluida com aumento de NaCl.

Answer

C) Tampão fosfato pH = 6,0. É mais adequado realizar a separação em pH próximo ao pI para não haver desnaturação da proteína e ter maior eficiência na separação.

Answer

D) Tampão Tris-HCl pH = 7,5. Em pH acima do pI a proteína está carregada negativamente, ligando-se à resina aniônica e sendo eluida por aumento da força iônica.

Answer

E) Tampão Tris-HCl pH = 7,5. Em pH acima do pI a proteína está carregada positivamente, ligando-se à resina aniônica e sendo eluida pela diminuição da força iônica.

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