Question

Após seguidas etapas de purificação de proteínas utilizando diferentes tipos de cromatografia, um pesquisador chegou a uma fração com banda única em um gel de poliacrilamida em condição desnaturante e redutora. Satisfeito com o resultado, o pesquisador resolveu verificar o grau de pureza da amostra. Para tal utilizou uma fita de gel com gradiente de pH variando de 3 a 10 para a focalização isoelétrica, em condições redutoras. Em seguida, aplicou a fita sobre um gel de poliacrilamida, também em condição desnaturante e redutora. Ao finalizar a corrida e proceder com a coloração, seguida da descoloração do gel, verificou que havia três manchas no gel, correspondentes a três proteínas com o mesmo peso molecular demonstrado no primeiro gel. Assinale a alternativa que explica o resultado. 9

Accepted Answer

E) As três manchas correspondem a três proteínas com mesmo peso molecular e diferentes pontos isoelétricos.

Answer

A) Trata-se de um artefato, pois o primeiro gel que mostrou uma banda única tem o poder de resolver todas as possíveis proteínas na amostra.

Answer

B) Trata-se de três isômeros da proteína que foram separados quando submetidos à eletroforese bidimensional.

Answer

C) O segundo gel revelou que o pesquisador falhou na execução da primeira eletroforese que revelou uma banda, pois todas deveriam aparecer.

Answer

D) O resultado revelou que a proteína foi degradada e os fragmentos foram agora separados.

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