Question

Um bioquímico está desenvolvendo um método analítico para quantificar um novo fármaco em plasma, utilizando a espectrofotometria UV-Vis. Para isso, ele prepara uma série de soluções-padrões em concentrações crescentes. Ao plotar a curva de calibração (absorbância versus concentração) no gráfico, ele observa que, nas concentrações mais baixas, a relação é linear, mas, em concentrações muito altas, o gráfico apresenta uma curvatura para baixo. Qual dos seguintes princípios teóricos da espectrofotometria melhor explica essa observação e qual seria a medida correta para o toxicologista garantir a validade da sua análise?

Accepted Answer

A) A Lei de Beer-Lambert, que estabelece a proporcionalidade direta entre absorbância e concentração, deixa de ser válida em altas concentrações devido a interações moleculares e variações no índice de refração, sendo necessário diluir a amostra para que a leitura caia na faixa linear da curva de calibração.

Answer

B) A absortividade molar (ε) da substância varia com a concentração, tornando impossível a quantificação precisa em qualquer faixa de leitura.

Answer

C) Ocorre a precipitação da substância nas altas concentrações, o que diminui a quantidade de analito em solução, sendo necessária a dissolução da amostra em outro solvente.

Answer

D) Ocorre a saturação do detector do espectrofotômetro, pois a intensidade de luz transmitida é muito baixa, exigindo o uso de um comprimento de onda diferente ou um instrumento mais sensível.

Answer

E) A solução está muito diluída e a absorbância está abaixo do limite de detecção (LOD), indicando a necessidade de usar uma cubeta com maior caminho óptico.

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