Question

Os resultados de uma reação em cadeia da polimerase (PCR) são geralmente visualizados por meio do uso da Eletroforese em gel, a exemplo da genotipagem para Rh vista a seguir: Devido à alta homologia existente entre os genes RHD e RHCE, a estratégia utilizada na genotipagem RHD levou em consideração as diferenças existentes entre eles em duas regiões genômicas: íntron 4 e éxon 10. No íntron 4, o gene RHCE possui 600 pb a mais que o gene RHD, enquanto na região 3', não traduzida do éxon 10, o gene RHD possui 47 pb a mais que o gene RHCE. Assim, foram utilizados primers, que permitem determinar a presença do gene RHD por meio da análise direta do produto de PCR, após eletroforese em gel de agarose a 1,5% (Figura 1). 14

Figura da questão (imagem do caderno de prova)

BIÓLOGO Figura 1. Genotipagem RHD em duas regiões genômicas: intron 4 (Amostras 1 a 3) e exon 10 (Amostras 6-8). Amostras 1 e 3: RHD+, Amostra 2: RHD-. Amostra 5: Marcador molecular de 100pb. Amostras 6-8: RHD +, Amostra 7: Amostra RHD-. Fonte: http://www.scielo.br/pdf/rbhh/v28n4/a10v28n4.pdf (Adaptado) Sobre isso, é CORRETO afirmar que

Accepted Answer

E) as amostras 6, 7 e 8 são relativas ao éxon 10 e correspondem ao gene RHD. As amostras 6 e 8 possuem duas bandas 160pb e 245pb e equivalem ao fenótipo Rh positivo, enquanto a amostra 7 possui apenas a banda de 160pb, sendo do tipo Rh negativo.

Answer

A) um padrão ou ladder (amostra 5) é incluído no gel para que o tamanho dos fragmentos nas amostras da PCR possa ser determinado. Dessa forma, as amostras 1, 2 e 3 possuem bandas de 235pb e, portanto, possuem o mesmo fenótipo.

Answer

B) as amostras 1, 2 e 3 são relativas ao íntron 4. As bandas de 115pb correspondem ao gene RHCE enquanto as bandas de 236pb correspondem ao gene RHD e distam 121pb em relação ao gene RHCE, todos de fenótipo Rh negativo.

Answer

C) muitas cópias precisam estar presentes, antes que possamos vê-las a olho nu, mas a PCR nem sempre produz cópias suficientes, de modo que possamos ver ou manipular aquela região de DNA, como na amostra 4 do íntron 4 para o gene RHCE.

Answer

D) fragmentos de DNA de mesmo comprimento formam uma banda no gel, que pode ser vista a olho nu. Como a intensidade de coloração das bandas de 160 pb das amostras 6, 7 e 8 é diferente, indica que a banda da amostra 8 possui um número inferior de pb.

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