Question

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Um método para se medir o crescimento bacteriano é a contagempadrão em placas contendo meio nutritivo solidificado em ágar. Devido à dificuldade de se contar mais do que 300 colônias em uma placa com meio em ágar, se faz necessário diluir a cultura bacteriana original antes de sua transferência, em volume conhecido de cultura, para a placa contendo o meio sólido. A transferência pode ser feita tanto através do método da placa derramada (pour plate) ou como pelo método de espalhamento em placa (spread plate), como mostra a figura abaixo.

Figura da questão (imagem do caderno de prova)

Considerando o que mostra a figura e sobre o uso desses métodos na contagem bacteriana, assinale a afirmativa incorreta.

Accepted Answer

D) A precisão do método de contagem em placa é afetada pela morte das células. Por isso, o número de colônias contadas representa o número de organismos vivos, a contagem não inclui aqueles que possam ter morrido durante o plaqueamento; também não inclui os organismos que não podem crescer no meio escolhido. Por isso, o uso de culturas jovens na fase de latência (lag) de crescimento diminui este tipo de erro.

Answer

A) No método pour plate, as colônias se desenvolvem tanto dentro do meio quanto na sua superfície. As células suspensas no ágar fundido durante a preparação poderão ser danificadas pelo calor e, assim, não formarão colônias. Aquelas que crescem dentro do ágar formarão colônias menores do que aquelas que crescem na superfície. Esse método é particularmente útil para o crescimento de microaerófilos que são intolerantes à exposição do ar na superfície do meio.

Answer

B) A precisão do método da diluição em série e do método de contagem em placa depende da dispersão homogênea dos organismos em cada diluição. Os erros podem ser minimizados agitando-se cada cultura antes de se tirar a amostra e fazendose diversas placas para cada diluição.

Answer

C) Um fator de diluição de 103 seria expresso por 1:1.000 ou 1/1.000 e um fator de diluição de 104 seria expresso por 1:10.000 ou 1/10.000. O cálculo de uma contagem média de colônias de 92 bactérias que foram produzidas a partir do plaqueamento de uma diluição de 1/100.000 (fator de diluição de 105) seria o seguinte: 92 x 100.000 = 9.200.000 ou 9,2x 106 UFC/mL.

Answer

E) No método spread plate, todas as células permanecem na superfície do meio sólido. A amostra diluída é colocada no centro da placa com o ágar esfriado. É espalhada de forma homogênea pela superfície com o uso da alça de Drigalsky estéril e, após a incubação, as colônias se desenvolvem na superfície do ágar.

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