Question

O sistema CRISPR é um mecanismo de sistema imunológico adaptativo presente em diversas bactérias e na maioria das Archaea caracterizadas. Recentemente este método foi adaptado para a edição de genomas em organismos multicelulares, incluindo vários organismos-modelo como camundongos, peixes, moscas dentre outros. Sobre esse sistema, é correto afirmar que:

Accepted Answer

E) o complexo Cas9-sgRNA reconhece seu alvo no DNA através de pareamento Watson–Crick entre o sgRNA e o DNA-alvo no genoma e através de interações entre Cas9’s com o sítio PAM adjacente ao sítio de reconhecimento do sgRNA.

Answer

A) desde sua descoberta, Cas9 tem sido utilizada em múltiplos organismos; todavia outras nucleases, como ZFNs and TALENs, recém- -descobertas, tendem a substituir o sistema Cas9 num futuro próximo.

Answer

B) com a clivagem do DNA por Cas9, uma quebra de fita dupla é gerada, levando ao único mecanismo conhecido de reparo de DNA de fita dupla, o reparo direcionado por homologia (em inglês homology-directed repair – HDR).

Answer

C) embora o sistema CRISPR/Cas9 seja muito poderoso nas realizações de nocautes (knock- -outs), ainda não foi reportada a inclusão de novos pedaços de DNA nos genomas (knock- -in) nem mutações sítio-dirigidas.

Answer

D) uma das principais vantagens do sistema CRISPR/Cas9 é o estudo de genes essenciais, uma vez que a remoção de ambas as cópias de um determinado gene essencial (nocaute) é compatível com a vida e, portanto, pode ser estudada com a utilização de CRISPR/Cas9.

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