Questão de Biologia e Ciências

Leia o texto e analise a figura. BIÓLOGO O procedimento da técnica de PCR em tempo real segue o princípio geral da PCR convencional. Assim, apresenta as três fases características da PCR: A primeira fase é bastante específica e precisa. Na fase de crescimento linear, os produtos da reação são consumidos e iniciam o processo de degradação. A fase estacionária corresponde ao final da análise devido ao elevado nível de degradação dos produtos da PCR. Os compostos fluorescentes adicionados ao DNA geram um sinal de fluorescência que é diretamente proporcional à quantidade de produto amplificado ao longo das diferentes fases e que podem ser representados como demonstrado na Figura a seguir:

Fontes: https://core.ac.uk/download/pdf/15567888.pdf (Adaptado) Disponível em:https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/4355693/course/section/2085886/real%20time%20pcr%20basico.pdf Leia as afirmativas sobre a curva de amplificação da PCR em tempo real. I. Na linha basal, há produtos da PCR suficientes para detectar fluorescência. Na fase log, a quantidade de produtos da PCR dobra a cada ciclo. Na fase platô, há um maior aumento no número de produtos. II. A fase de crescimento exponencial é considerada a pior para se estudar a reação devido à baixa eficiência registrada; por esse motivo, os dados de fluorescência são geralmente recolhidos desde o início do processo de amplificação. III. A interpretação dos resultados obtidos pelos equipamentos obriga a que se definam conceitos específicos, como baseline, ponto CT e threshold. A baseline corresponde ao limiar mínimo de detecção de fluorescência do instrumento, sendo considerado “ruído de fundo” do equipamento. IV. O ponto CT - cycle threshold, corresponde ao número de ciclos necessários para que a fluorescência da reação seja detectável. Trata-se de um ponto a partir do qual a fluorescência detectada ultrapassa o limiar da fase exponencial, conhecido como threshold, definido automática e arbitrariamente pelo software do equipamento em função da baseline. V. O valor mínimo de CT é dependente da quantidade de moléculas presentes no início do processo de amplificação, o que significa que um menor número de moléculas inicialmente representa um maior número de ciclos requeridos para gerar um aumento exponencial do sinal da fluorescência que seja significativamente superior à baseline. Estão CORRETOS