Question

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Com o objetivo de melhorar a seleção do plano de foco para obter imagens de microscopia confocal a laser de uma amostra biológica marcada com uma sonda fluorescente, o operador do microscópio decidiu utilizar um pinhole de tamanho menor. Notou que isso melhorou o contraste e a seleção do plano focal, resultando em uma imagem de melhor qualidade. Decidiu que reduziria o tamanho do pinhole até o mínimo possível. Escolha a alternativa que aponta corretamente o que ocorre com essa decisão.

Accepted Answer

E) O pinhole terá efetiva influência na resolução axial até atingir o diâmetro de uma unidade de Airy, ponto a partir do qual haverá um grande comprometimento da intensidade do sinal, sem grande ganho de resolução.

Answer

A) A resolução será melhorada exponencialmente à medida que o pinhole for fechado, até o limite de detecção da luz que passa através do orifício quando este estiver muito fechado.

Answer

B) A resolução não será afetada, mas a razão sinal/ruído será aumentada, pois o pinhole menor eliminará mais luz oriunda de planos da amostra que estão fora do plano focal, resultando em melhor contraste.

Answer

C) A qualidade da imagem irá deteriorar continuamente com a redução do diâmetro do pinhole, que deve ter seu diâmetro aumentado sempre que se deseja melhorar a qualidade da imagem.

Answer

D) O pinhole terá pouca influência na qualidade ou na resolução da imagem obtida, sendo a resolução definida unicamente pela abertura numérica da objetiva utilizada.

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