Question

A técnica de amplificação em cadeia da polimerase (PCR) é composta por três etapas: desnaturação da dupla fita de DNA, anelamento dos oligonucleoơdeos e extensão da cadeia. É correto afirmar que:

Accepted Answer

C) a eficiência da reação é avaliada pelo slope, onde E = 10 (-1/slope) - 1

Answer

A) a desnaturação da dupla fita de DNA é gerada pelo aumento de temperatura, o anelamento dos oligonucleoơdeos ocorre em sequências específicas do alvo de interesse a ser amplificado e a extensão da cadeia pela enzima Taq I DNA.

Answer

B) a temperatura de anelamento é específica para cada ensaio uma vez que é diretamente dependente da composição de bases (A+T e C+G), cada sequência de oligonucleoơdeos possui seu próprio Tm (“MelƟng Temperature”- temperatura onde 60% dos oligonucleoơdeos estão anelados à fita molde).

Answer

D) a definição do Tm da reação não é um fator essencial e críƟco para a realização de uma reação de PCR com desempenho saƟsfatório.

Answer

E) o número de ciclos necessários para uma reação chegar na fase exponencial independe da quanƟdade de material no início da reação, ou seja, quanto maior a quanƟdade de DNA ou RNA no início da reação menor o Ct (Ct - “Ciclo Threshold”) que será detectado.

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