Question

Durante um monitoramento de vigilância sanitária em uma comunidade rural vulnerável, biólogos coletaram amostras ambientais de água e fezes de animais domésticos para rastrear a contaminação por protozoários patogênicos veiculados pela água. Para diferenciar cistos viáveis de cistos inviáveis de Giardia duodenalis, a equipe técnica precisa escolher uma estratégia metodológica que dispense o cultivo in vitro, visto que o parasita não se replica fora do hospedeiro. Neste caso, assinale a opção que indica a técnica que deve ser escolhida.

Accepted Answer

C) Utilização de PCR de transcrição reversa focada na detecção de RNA mensageiro de genes constitutivos, cuja presença indica presença de RNAm compatível com viabilidade.

Answer

A) Utilização de PCR convencional direcionada ao DNA genômico total, dado que o DNA de cistos mortos se degrada instantaneamente no ambiente.

Answer

B) Aplicação do método de sedimentação por centrifugaçãoflutuação com sulfato de zinco, visto que apenas os cistos viáveis possuem densidade menor que 1,18 g/mL.

Answer

D) Realização de microscopia de fluorescência direta utilizando anticorpos monoclonais anti-Giardia, pois os anticorpos ligam-se exclusivamente às proteínas da parede celular de cistos vivos.

Answer

E) Mensuração dos níveis extracelulares de antígenos fecais (GSA-65) por ELISA na água filtrada, já que esse complexo proteico só é secretado ativamente por cistos metabolicamente funcionais.

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