Question

O método de sequenciamento de Sanger, descrito em 1977 por Frederick Sanger e colaboradores, considerado de primeira geração, continua até os dias atuais sendo amplamente utilizado para o sequenciamento de fragmentos longos. Sobre este método assinale a alternativa correta:

Accepted Answer

E) As amostras para o sequenciamento de Sanger precisam ser amplificadas por PCR na presença de didesoxiribonucleotídeos (ddNTPs) fluorescentes terminadores de cadeia.

Answer

A) O método de Sanger é utilizado nas plataformas de segunda geração de sequenciamento, tais como, Illumina, pirosequenciamento e 454.

Answer

B) Amostras para o sequenciamento de Sanger devem passar por um processo de produção de bibliotecas de DNA, em que são inseridas sequências específicas no fragmento que será sequenciado.

Answer

C) O sequenciamento de Sanger não necessita de amplificação de fragmento por PCR, havendo o sequenciamento direto dos fragmentos de DNA da amostra.

Answer

D) Os ddNTPs são didesoxiribonucleotídeos que possuem hidroxila na posição 3' da ribose, permitindo assim a amplificação da cadeia pela formação da ligação fosfodiéster.

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