Questão de Estatística

Dentre os métodos moleculares mais utilizados na rotina laboratorial, a PCR (reação em cadeia de polimerase) tem ganhado destaque. Sobre a técnica de PCR e suas variações, assinale com V as afirmativas verdadeiras e com F as falsas. ( ) A PCR convencional consiste em um método de amplificação de um fragmento de DNA específico. Essa especificidade é conferida ao teste pela utilização de iniciadores que devem reconhecer apenas o DNA do microrganismo pesquisado, não se ligando ao DNA humano, também presente na amostra. Ao término dos ciclos de PCR, o fragmento amplificado deve ser identificado por eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida. ( ) A RT-PCR é uma variação da PCR convencional. Nessa técnica, moléculas de RNA são convertidas a cDNA por uma enzima chamada de transcriptase reversa. As moléculas de cDNA assim produzidas são submetidas aos ciclos de amplificação da PCR. O cDNA, apesar de produzido a partir de um RNA, é igual ao DNA gênomico. ( ) A PCRq é outra variação da PCR convencional. Nessa técnica, o processo de amplificação do fragmento de DNA alvo é visualidade em tempo real pela emissão de fluorescência que é liberada a cada fita nova de DNA formada. Essa metodologia permite ensaios qualitativos e quantitativos. ( ) Existem duas estratégias para a emissão de fluorescência no teste PCRq: em uma se utiliza o corante SYBR green e em outra são utilizadas sondas fluorescentes. A primeira estratégia é mais específica que a segunda, pois o corante SYBR green é gene-específico, isto é, se liga apenas ao DNA alvo. Assinale a sequência correta.