Question

( ) Ampliar a imagem e permitir sua visualização. ( ) Concentrar o feixe de luz visível antes dele tocar a lâmina. ( ) Fixar as objetivas no microscópio óptico. ( ) Apoiar todas as partes do microscópio. ( ) Ajustar o foco da imagem. ( ) Ampliar a imagem de acordo com seu poder de resolução. ( ) Apoiar a lâmina.

A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma reação de amplificação do material
genético. Suponha que você deva fazer uma reação de amplificação com volume final de 50
microlitros, utilizando 5 microlitros de tampão 10X; 3,0 microlitros de MgCl a 50 mM; 2,0
2
microlitros de desoxirribonucleotídeos (dNTP) a 10 mM; 0,5 microlitros do Iniciador 1 a 20
mM; 0,5 microlitros do iniciador 2, a 20 mM; 0,5 microlitros de Taq DNA polimerase a 6
Unidades por microlitro; 3 microlitros de DNA a uma concentração de 150 ng por microlitro; e
14,5 microlitros de água. Qual a concentração final de cada reagente supracitado?

Accepted Answer

A) Tampão: 1 X; MgCl : 3mM; dNTPs: 0,4 mM; Iniciador 1: 0,2 mM; Iniciador 2: 0,2 mM; Taq 2 DNA polimerase: 3 unidades por microlitro. DNA: 450 ng.

Answer

B) Tampão: 0,5X; MgCl : 1,5mM; dNTPs: 0,2 mM; Iniciador 1: 0,1 mM; Iniciador 2: 0,1 mM; 2 Taq DNA polimerase: 1,5 unidades por microlitro. DNA: 225 ng.

Answer

C) Tampão: 2X; MgCl : 6mM; dNTPs: 0,8 mM; Iniciador 1: 0,4 mM; Iniciador 2: 0,4 mM; Taq 2 DNA polimerase: 3 unidades por microlitro. DNA: 850 ng.

Answer

D) Tampão: 1X; MgCl : 1,5mM; dNTPs: 0,2 mM; Iniciador 1: 0,4 mM; Iniciador 2: 0,4 mM; Taq 2 DNA polimerase: 1,5 unidades por microlitro. DNA: 450 ng.

Answer

E) Tampão: 2,0X; MgCl : 3,0 mM; dNTPs: 0,4 mM; Iniciador 1: 0,2 mM; Iniciador 2: 0,2 mM;

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