Questão de Química

O tampão fosfato de sódio é amplamente utilizado na homogeneização de órgãos e tecidos animais para ensaios enzimáticos. Durante seu treinamento em um laboratório, um estagiário recebeu a tarefa de preparar uma solução tampão a 50 mM, pH 7,4. Ele seguiu os seguintes procedimentos: 1. Pesou 12 g de NaH2PO4, adicionou 100 mL de água, misturou e rotulou como “Solução de NaH2PO4 1 M”. 2. Pesou 142 g de Na2HPO4, dissolveu em 80 mL de água e completou para 100 mL, rotulando como “Solução de Na2HPO4 1 M”. No dia seguinte, ao retornar ao laboratório, percebeu que as soluções que havia preparado tinham sido utilizadas. Com autorização, utilizou soluções estoque de NaH2PO4 e Na2HPO4 preparadas a 1 M, disponibilizadas por um técnico experiente do laboratório. Ele prosseguiu da seguinte forma: 3. Misturou 100 mL da solução de NaH2PO4 com 60 mL da solução de Na2HPO4, rotulando como “Tampão fosfato de sódio 1 M, pH 7,4”. 4. Diluiu 5 mL do tampão preparado em “3” com 100 mL de água, rotulando como “Tampão fosfato de sódio 50 mM, pH 7,4”. Para todos os procedimentos, o estagiário considerou as seguintes informações presentes no livro de protocolos do laboratório: Durante esses dois dias, quantos procedimentos exatamente foram realizados de forma incorreta?