Question

No diagnóstico de doenças de plantas, a quantificação e avaliação de pureza do DNA de fitopatógenos são etapas cruciais antes de prosseguir com reações de PCR. A análise é feita medindo a absorbância em espectrofotômetro de microvolume. Com base nessa técnica, assinale a alternativa CORRETA.

Accepted Answer

B) Uma razão de absorbância de A260/A280 entre 1,8 e 2,0 indica uma amostra de DNA puro, livre de contaminações significativas por proteínas.

Answer

A) Para quantificar DNA de fita dupla, avalia-se a absorbância de 280nm, considerando que uma absorbância de 1,0 equivale a uma concentração de 50ng/μL.

Answer

C) O padrão de referência utilizado para a leitura da concentração de DNA é em 230nm, pois o material genético absorve luz fortemente nessa faixa do ultravioleta.

Answer

D) Se a razão A260/A280 for muito inferior a 1,6, isso é um indicativo característico de alta pureza do DNA e total ausência de impurezas como polissacarídeos ou sais.

Answer

E) A espectrofotometria por absorbância UV permite quantificar o DNA independentemente da presença de RNA, visto que ambos exibem picos de absorbância em comprimentos de onda distintos. 13

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