Question

O laboratório de citogenética do hospital apresentou um índice de falha de cultura de 85% para culturas de linfócitos em sangue periférico na última semana. O problema manifesta-se por um índice mitótico extremamente baixo ou nulo e uma morfologia celular de “células fantasmas” após a colheita. Observou-se que, após as primeiras 12 a 24 horas de incubação, o meio de cultura (RPMI 1640 suplementado com 20% de soro fetal bovino e fito-hemaglutinina) apresentava uma coloração púrpura/fúcsia persistente em todos os frascos; e a temperatura da incubadora se manteve estável em 37 C. Assinale a opção que identifica corretamente a causa mais provável deste evento sistêmico e a respetiva correção técnica.

Accepted Answer

C) Desvio na calibração do sensor de CO2 da incubadora, resultando numa concentração real de dióxido de carbono inferior a 5%; correção via recalibração externa do sensor e ajuste do fluxo para garantir o tamponamento do bicarbonato.

Answer

A) Contaminação por Mycoplasma spp. em larga escala; correção via esterilização por radiação gama de todos os reagentes e descarte de unidades de soro em uso.

Answer

B) Degradação da fito-hemaglutinina (PHA) por flutuação térmica no transporte; correção através do aumento da dose de PHA para o dobro da concentração padrão.

Answer

D) Toxicidade por excesso de colchicina/colcemid; correção via redução do tempo de exposição para 10 minutos.

Answer

E) Incompatibilidade do detergente utilizado na lavagem manual da vidraria de cultivo; correção via substituição por descartáveis de poliestireno de baixa aderência.

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