Question

Um pesquisador deseja purificar uma proteína recombinante presente em um lisado celular bruto. A proteína de interesse possui massa molecular de 60 kDa, ponto isoelétrico (pI) de 6,5 e foi expressa com uma cauda de histidina para facilitar a purificação. O objetivo é obter uma amostra altamente purificada, adequada para análise estrutural e, posteriormente, armazená-la a longo prazo. Assinale a alternativa que apresenta a sequência adequada para a purificação e armazenamento da proteína.

Accepted Answer

A) Centrifugação e recolher o sobrenadante; cromato-
grafia de exclusão por tamanho; cromatografia de
troca iônica; cromatografia de afinidade; armazena-
mento a 4 oC.

Answer

B) Centrifugação e recolher o precipitado; cromato-
grafia de afinidade; cromatografia de exclusão por
tamanho; armazenamento em tampão fisiológico e
glicerol a –20 oC.

Answer

C) Centrifugação e recolher o sobrenadante; precipita-
ção com sulfato de amônio; diálise; armazenamento
a –80 oC.

Answer

D) Centrifugação e recolher o precipitado; cromatogra-
fia de troca iônica; cromatografia de exclusão por
tamanho; armazenamento em tampão fisiológico e
glicerol a –20 oC.

Answer

E) Centrifugação e recolher o sobrenadante; cromato-
grafia de afinidade; cromatografia de troca iônica;
cromatografia de exclusão por tamanho; adição de
glicerol e armazenamento a –80 oC.

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